俄罗斯黄花草木樨生物活性成分资源的分布与开发利用

为了查明生物活性成分在黄花草木樨根、茎、叶、子中的含量与分布特征,本研究重点开展了黄花草木樨活性成分的检测及田间开发试验。分别采用凯式定氮法和高效气相色谱法测蛋白质；氨基酸自动分析仪法测氨基酸；气相色谱-质谱、分子蒸馏仪检测脂肪酸；重量法检测皂苷与生物碱；高效液相色谱仪检测香豆素；福林试剂比色法检测多酚；蒽铜-硫酸比色法检测多糖；亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠比色法检测黄酮。按产量测算后,得出每公顷牧草生物活性成分的总产量为3016.3 kg/hm2。其中粗蛋白质、氨基酸和粗脂肪酸原料的产量分别为1400.6 kg/hm2,112.2 kg/hm2,1246.8 kg/hm2。有效成分皂苷、生物碱、多酚、香豆素的产量分别为97.0 kg/hm2、77.9 kg/hm2、41.7 kg/hm2、40.1 kg/hm2。上述成分经分离提取纯化后,可作为开发医药、食物、化工等生物技术产品的天然原料。本文为开发利用植物自然资源提供了新的途径。     

汞毒性对草木樨（Melilotus officinalis）幼苗基因型的差异性抑制研究

采用水平淀粉凝胶电泳技术对草木樨（Melilotus officinalis）的磷酸葡萄糖异构酶（Pgi）和苹果酸酶（Me）进行了基因频率分析。所研究的草木樨种群具有较高的多态性（A=3.0,Ho=0.346～0.401）,将草木樨种子暴露于HgCl2溶液（30mg·L-1）,萌发后测量各幼苗的上、下胚轴长度以及测定其基因型,判定各基因型与上、下胚轴长度的关系。ANOVA分析表明,对照组中Me-AA基因型幼苗具有下胚轴生长优势,Me-AA基因型个体的下胚轴长度（35.20mm±4.63mm）显著大于以下各基因型个体的下胚轴长度：Me-AB（22.84mm±1.34mm）,Me-BB（22.82mm±0.68mm）和Me-BC（20.00mm±1.21mm）。HgCl2急性暴露对Me各基因型下胚轴的抑制作用呈现均一性。在Pgi基因座,草木樨对照组中各基因型的生长不存在差异,但在HgCl2急性暴露下,Pgi-AC基因型幼苗的下胚轴长度（19.75mm±0.73mm）显著大于Pgi-BB基因型的下胚轴长度（14.67mm±1.04mm）,表明Pgi-AC基因型个体对HgCl2的耐受性更强。等位酶分析技术可用来确定植物的种群遗传结构对生长或重金属的耐受性关系，这种关系的确立对遗传育种、生态修复具有潜在的应用价值。     

铅胁迫对草木樨抗氧化系统的影响

用盆栽法研究了重金属铅胁迫对草木樨Melilotus suavena中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性,丙二醛(MDA)和体内铅含量的影响。结果表明:在0~1 500 mg/kg铅浓度梯度处理范围内,SOD、POD、CAT活性和MDA含量随铅处理浓度增加而上升。植株体内各器官的铅含量随外源铅处理浓度的增加而上升,根系铅含量与铅处理浓度呈正相关(R2=0.972**)。草木樨在29.942 g/kg的土壤铅浓度下仍能正常生长,体内最大铅积累量达654.93 mg/kg。根部铅的含量大于地上部总的含量,茎中的含量高于叶的含量。     

发根农杆菌介导的白花草木樨毛状根转化体系的建立

白花草木樨（Melilotus albus Medic.ex Desr.）是草木樨最常见的栽培用种之一，具有较强的抗逆性和固氮能力。为了开发一套高效的草木樨转化体系，本研究以白花草木樨为材料，以结瘤基因MaROP6为目的基因，建立了发根农杆菌（Agrobacterium rhizogenes）介导的高效白花草木樨毛状根转化体系。结果表明：利用该方法可以在两周左右获得毛状根，其发生率可达78%，MaROP6基因的毛状根转化率可达70.8%。qRT-PCR鉴定结果表明，MaROP6转基因毛状根的平均相对表达量为对照的36.87倍。毛状根转化体系的建立为白花草木樨基因功能的验证奠定了基础。     

PEG和NaCl胁迫对草木樨种子萌发和幼苗生长的影响

以筛选出的5份优异草木樨(Melilotus)种质PI595335、MO-LX04、PI595388、Ames19257和PI593234为材料,分别用不同渗透势的PEG(0、-0.3、-0.6、-0.9、~(-1).2、~(-1).5 MPa)及不同浓度的NaCl溶液(0、50、100、150、200、300mmol·L~(-1))模拟干旱和盐碱胁迫条件,采用纸上发芽法进行种子萌发试验,测定发芽率、发芽势、胚根幼苗长、发芽指数、活力指数等指标,并综合比较不同种质的抗旱及耐盐能力。结果表明,1)高渗透势(≥-0.3 MPa)的条件能不同程度地促进5份种质的萌发,对PI595335、MO-LX04、PI595388胚根和幼苗的生长有一定抑制作用,对Ames19257、PI593234胚根和幼苗的生长有显著的(P0.05)促进作用;而较低渗透势(≤-0.9 MPa)则显著抑制(P0.05)所有种子的萌发与幼苗生长。2)不同浓度的NaCl溶液对5份种质草木樨幼苗的生长均有显著的(P0.05)抑制作用,而低浓度的NaCl(≤100mmol·L~(-1))溶液能促进草木樨种子的萌发。3)用模糊数学隶属法综合评价结果显示,5份草木樨种质在种子萌发期抗旱性强弱为Ames19257PI593234MO-LX04PI595335PI595388,耐盐性强弱为PI593234Ames19257PI595388MO-LX04PI595335。其中Ames19257和PI593234在抗旱性和耐盐模拟试验中的表现均明显优于其它3份草木樨种质,更适于为今后杂交创制新种质提供遗传材料或在西北干旱、盐碱地区种植。     

添加甲酸+甲醛对草木樨青贮品质的影响

在刚收获及收获后经过8和30 h晾晒的初花期草木樨青贮料中,加入甲酸 甲醛进行青贮.结果表明,草木樨低水分(DM为44.98%)青贮可以使青贮料的氨态氮含量降低,并保存更多的干物质、粗蛋白质和可溶性糖.甲酸 甲醛青贮能明显改善草木樨青贮料的发酵品质,即降低青贮料的氨态氮含量和保存更多的可溶性糖和粗蛋白质.晾晒8 h组添加甲酸(2.0 ml/kg) 甲醛(2.0 g/kg)的效果最好;而晾晒30 h组添加甲酸(3.0 ml/kg) 甲醛(1.0g/kg)的效果最好.     

入侵植物黄花草木樨的生殖构件性状及种子萌发特性研究

黄花草木樨是广泛分布于我国的一种外来入侵植物,对被入侵地的生物多样性造成严重威胁.通过样方调查和种子萌发实验,对黄花草木樨的生殖构件特性和种子休眠萌发特性进行研究,并探讨其繁殖能力.结果表明,密度对黄花草木樨各生殖构件性状影响各不相同,单枝种子量、总种子量和百粒重与密度成反比,而分枝数在中密度下达到最大,高密度和低密度...     

提高草木犀遗传转化植株再生率技术的研究

[目的]确定草木犀遗传转化植株的适宜的除草荆选择压力。[方法]分别以草木犀试管苗的子叶、下胚轴和破坏生长点的茎尖为外植体,在含有0、1、3、5、10mg／L除草剂草丁膦的分化培养基Ms＋BA3mg/L＋LAA0．2mg/L中对其进行分化培养,筛选适宜的除草剂选择压力,在此选择压力下,对外植体进行遗传转化,并对转化芽进行分子水平检测。[结果]当除草剂浓度为3mg/L时,所有外植体均无再生芽;转化培养后,子叶、下胚轴和破环生长点的茎尖的再生率分别为0．48％、4．29％和10．1t％;分子水平检测结果显示,外源基因已成功转入草木犀转化芽中。[结论]除草剂对草木犀外植体的适宜选择压力为3mg／L,破坏生长点的草木犀茎尖对外源基因的转化效率较高。     

白花草木樨与燕麦混合青贮的研究

试验设置了单贮白花草木樨(Melilotus albus)、单贮燕麦(Avena sativa)、70%白花草木樨和30%燕麦混贮、50%白花草木樨和50%燕麦混贮与30%白花草木樨和70%燕麦混贮5个处理组,贮后分别测定其发酵品质和化学成分,由此找出白花草木樨和燕麦混合青贮的最佳比例.结果表明,单贮白花草木樨的pH值...     

狼毒对草木樨、多年生黑麦草的化感作用

为了解狼毒(Stellera chamaejasme L.)对2种优质牧草,草木樨(Melilotus suaveolens Ledeb)和多年生黑麦草(Lolium perenne L.)的化感作用,在恢复狼毒侵占严重的草地上,对草种进行合理选择,采用室内生物测定方法,研究狼毒根、茎叶粉碎物在土壤里腐解过程中对草木樨和多年生黑麦草幼苗生长的影响.结果表明:狼毒对草木樨的化感综合效应(SE)随狼毒根、茎叶量的增加而增大,最大值分别为62.9%和2.5%;狼毒根对多年生黑麦草的SE也随狼毒根量的增加而增大,最大值为29.5%;狼毒茎叶对多年生黑麦草幼苗的生长表现出促进作用,当茎叶量为3g/盆时,促进作用最大,SE为-1.8%.说明对同一受试植物而言,狼毒根对其抑制作用强于茎叶,狼毒对他种植物的化感抑制作用主要是通过根起作用.并且草木樨受狼毒化感抑制作用的影响大于多年生黑麦草,在人工建植植被恢复狼毒侵占严重的草地时,多年生黑麦草可作为选择草种.